(1)标准曲线的制作:
1%蔗糖标准液:将分析纯蔗糖在80℃下烘至恒重,精确称取。加少量水溶解,移入100mL容量瓶中,加入浓硫酸,用蒸馏水定容至刻度。
100ug/L蔗糖标准液:精确吸取1%蔗糖标准液1mL加入100mL容量瓶中,加水定容。取20mL刻度试管11支,从0-10分别编号,按表27-1加入溶液和水,然后按顺序向试管内加入蒽酮乙酸乙酯试剂和5mL浓硫酸,充分振荡,立即将试管放入沸水浴中,逐管准确保温1min取出后自然冷却至室温,以空白作参比,在630nm波长下测其吸光度,以吸光度为纵坐标,以糖含量为横坐标,绘制标准曲线,并求出标准线性方程。
试剂 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 100µg/ml
蔗糖标准液 0 水(mL)
蔗糖量(µg)0 20 20 40 40 60 60 80 80 100 100
(2)可溶性糖的提取
取新鲜植物叶片,擦净表面污物,剪碎混匀,称取-,共3份,分别放入3支刻度试管中,加入5-10mL 蒸馏水,塑料薄膜封口,于沸水中提取30min(提取2次),提取液过滤入25 mL容量瓶中,反复冲洗试管及残渣,定容至刻度。 3.显色测定:吸取样品提取液 mL于20 mL刻度试管中(重复2次),加蒸馏水,以下步骤与标准曲线测定相同,测定样品的光密度。
4.计算可溶性糖的含量(%) =(C×VT×n×100)/(W×VS ×10) C为从标准曲线查得的糖量(ug); VT 为提取液总体积(mL) VS为测定时取用的样品提取液体积(mL);n 为稀释倍数
6
W为样品质量(g)
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