维普资讯 http://www.cqvip.com ・３３９０・ 实用医技杂志２００６年１０月第１３卷差 ！塑 旦 ！ ！： ！！： ！ ！： ！ ： ！！兰！ ！ ！ ｎ ）。 合成较多的ＣＲＰ等急性期反应蛋白，ＣＲＰ反应迅速而敏感， ２．２ ＡＭＩ患者溶栓时ＣＲＰ的动态变化 见表１。 常常较正常值增大十至上百倍，是正性的急性期蛋白 。 表１ 急性心肌梗死患者溶栓前后ＣＲＰ的动态变化 本组实验结果显示ＡＭＩ患者溶栓前后血清ＣＲＰ水平变 化特点为：ＡＭＩ患者溶栓前血清ＣＲＰ水平显著高于对照组 （Ｐ＜０．Ｏ１），此可能是生理性应急反应的结果，可提示患者存 在心肌缺血、缺氧，ＣＲＰ可能是反映心肌缺血的敏感指标之 一。两组ＡＭＩ患者溶栓前血清ＣＲＰ水平均显著高于对照 组；随后逐渐增高，在发病后２ ｄ～３ ｄ达高峰，再通组与未通 组相比血清ＣＲＰ峰值差异有显著性；发病１ ｄ－－２ ｄ再通组与 未通组相比血清ＣＲＰ水平差异无显著性，发病３ ｄ－－７ ｄ再通 组显著低于未通组，仍显著高于对照组（再通组７ ｄ除外）；再 通组第７天时血清ＣＲＰ水平与对照组差异无显著性。由于 注： 与对照组比较Ｐ＞０．０５．其他各组数据与对照组比较为Ｐ＜ 溶栓疗法可缩小心梗面积，减少心功能衰竭的发生，溶栓再通 ０ ０１。 后增加了心肌血流灌注，改善了心肌缺血，使ｃＲＰ产生减少。 ３讨论 ＣＲＰ是一种在肝细胞内合成的急性期反应蛋白，能激活 由以上特点及分析认为，动态观察血靖ＣＲＰ水平变化对溶栓 治疗、预后判断具有临床使用价值。 补体、促进吞噬并具有其他的免疫作用，在各种急慢性感 参考文献： 染、组织损伤、恶性肿瘤、心肌梗死、手术创伤、放射性损伤时， ［１］ 焦阳，洪小苏．急性心肌梗死溶栓治疗对血浆【、一反应蛋白水平 ＣＲＰ在发病初期迅速升高，病变好转时又迅速降至正常，而 的影响［阳．中国血液流变学杂志，２００２，１１（４）：３１５－３３１． 且不受放疗、化疗、皮质激素治疗的影响【＿３］。 ［２］徐永全．Ｃ一反应蛋白测定在急性心梗患者中的，临床意义［Ｊ］．实 近年的研究显示，ＣＲＰ与心血管疾病有关，认为它是一 用医技杂志，２００３，１Ｏ（１０）：１１ ２６． 个被低估没有被充分利用的指标。很多研究表明，ＣＲＰ与动 ［３］Ｅｄｉｏｒｉａ１．Ｃ—ｒｅａｃｔｉｖｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｕｎｄｅｒｖａｌｕｅｄ，Ｕｎｄｅｒｕｔｉｌｉｚｅｄ［Ｊ］．Ｃｌｉｎ 脉粥样硬化、冠状动脉疾病乃至心肌梗死的发生、发展和预后 Ｃｈｅｍ，１９９７，４３（１）：２０１ ７． 有密切的关联，其临床应用的前景值得高度关注。在心血管 ［４］ 张京梅．急性首次Ｑ波梗死患者Ｃ一反应蛋白的，临床研究［Ｊ］．中 疾病的治疗中，有研究显示，ＣＲＰ可以与其他再灌注指征用 国危重急救医学，２００１，１３（３）：１３０—１３３． 作溶栓治疗的参考指标：ＣＲＰ浓度的高低对再灌注无诊断意 ［５］Ｄｕ Ｃｌｏｓ Ｔｗ，Ｍａｒｎｅｌｌ Ｉ ，Ｚｌｏｃｋ ＬＲ，ｅｔ ａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｂｉｎｄｉｎｇ 义，但其高峰的提前出现，可以与ＣＫ一起用作再灌注的一个 ｏｆ ｃ—ｒｅａｃｔｉｖｅｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｔｏ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｓｕｂｕｎｉｔｓ［Ｊ］、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ， １９９１，１４６：１ ２２０． 参考指标ｌ｛一。ＡＭＩ发生后患者血清ＣＲＰ水平增高的机制可 （收稿日期：２００６ ０６—１６） 能是ＡＭＩ时心肌组织的损伤和坏死，引起局部单核巨噬细胞 的聚集和激活，ＴＮＦ、ＩＬ一６等细胞因子释放增多，诱导肝细胞 超高倍显微分析系统在支原体活体检查中 的临床应用研究 刘长德，张 艳，于成源 （清华大学玉泉医院，北京１０００４９） ［摘要］目的：建立超高倍显微分析系统观察活体支原体的实验方法，探讨其在临床的应用价值。方法：应用超 高倍显微分析系统直接镜检动态观察支原体，并与培养法实验结果对照。结果：超高倍显微分析系统和培养法结果的 符合率为８３．５ ，两种方法结果经卡方检验，具有高度相关性（７。一１５１，Ｐ＜０．０５）。两种方法的检测结果经卡方检验 差异无显著性（７ 一３．０１，Ｐ＞０．０５）。结论：超高倍显微分析系统在支原体活体观察上具有直接、简便、快速的特点， 可以作为目前支原体检测方法的有效补充。 ［关键词］超高倍显微分析；支原体；活检 ［中图分类号］Ｒ４４６［文献标识码］Ｂ［文章编号］１６７１－５０９８（２００６）１９－３３９０－０２ 目前，在生殖道发现的支原体主要有五种，其中解脲支原 目前比较公认的方法是进行支原体的分离培养，但耗时较长， 体、人型支原体、生殖支原体为主要的致病支原体，它们可导 很难满足临床的要求；ＰＣＲ方法具有敏感、快速等特点，但对 致泌尿生殖系统感染，与慢性前列腺炎、宫颈炎、阴道炎等都 实验室的设备、技术、要求较高，检测费用也较高。因此寻找 有着密切关系，也是导致男女不孕的重要原因＿】ｊ。支原体大 一种快速、简便、价廉的支原体检测方法是临床迫切需要的。 小一般在０．３ ｍ～０．５ ｆｘｍ之间，没有细胞壁，呈高度多形 超高倍显微镜是一种高倍率显微放大系统，倍率变化范围４０ 性。支原体培养营养要求高，生长缓慢。对于支原体的检测， ～１５ ０００，是显微放大技术与数字化图像处理系统的完美结 ＊基金项目：清华大学玉泉医院科研基金资助 维普资讯 http://www.cqvip.com 实用医技杂志２００６年１ｏ月第１３卷第１９期（半月刊） ＪＰＭＴ，Ｏｃｔｏｂｅｒ．２ｏ ！ Ｉ ，． ： ！ 墨！ ！ ！ 合。近些年来，一些医院尝试把超高倍显微分析系统应用于 支原体的活体检查，但此方法在业内一直倍受争议 ］，然而科 学、严谨的论证进行的并不多。为了观察超高倍显微分析系 统在支原体活体检查中的应用价值，我们于２００４年３月至 ２００６年５月，应用ＷＸ一２．０ Ｂ万倍光电显微镜对临床３３９份 泌尿生殖道炎症的患者的尿道、阴道、宫颈分泌物进行了支原 体活体检查，同时采用液体培养法进行对照。现报道如下。 １材料和方法 １．１标本来源３３９份标本来自本院妇科、泌尿科、皮肤科， 男８５份，女２５４份。具有泌尿生殖道感染症状，高度怀疑支 原体感染者。 １．２标本采集 １．２．１ 男性尿道分泌物 清洁尿道口，用男性无菌拭子插入 尿道口２ ｃｍ～３ ｃｍ，旋转，停留３０ Ｓ，取出拭子送培养和镜检。 １．２．２ 宫颈分泌物 用无菌拭子擦净宫颈口，再用女性拭子 插入宫颈口３ ｃｍ～４ ｃｍ，用力旋转，停留３０ Ｓ，取出拭子送培 养和镜检。 １．２．３ 阴道分泌物 用女性拭子取阴道后穹窿分泌物，送培 养和镜检。 １．３仪器 采用超高倍多媒体显微成像分析系统，型号为 ＷＸ一２．０ Ｂ由北京中科博兴科技发展有限公司生产，可放大 １０ ０００倍以上，分辨率为０．２２ ｍ，可共轭变焦，无极放大，提 供明暗视野。相差观察，并配有多媒体计算机，具有捕获、存 储、回放、查询、打印图像等功能。 １．４ 检查方法 １．４．１ 支原体的超高倍显微镜观察 用专用无菌拭子取样， 然后滴加生理盐水０．５ ｍｌ洗脱，取一点于载玻片上，盖上盖 玻片，超高倍镜下观察 １．４．２解脲支原体和人型支原体的形态的确认 解脲支原 体和人型支原体标准菌株分别作液体和固体培养平板的培 养。培养基由珠海益民生物工程制品厂提供，操作严格按说 明书进行。液体培养后离心，取沉淀物观察其形态特征；固体 培养后，将菌落取 ，放在载玻片上，用酒精灯适度轻烤，使菌 落部分的琼脂溶化在玻片上，应用超高倍显微镜观察支原体 形态。 １．４．３诊断标准的确定 参照曹兴午拟定的支原体识别标 准和新编临床检验图谱［３ ，结合我们的观察结果，确定如下诊 断标准：观察１Ｏ高倍视野，至少找到１个游离支原体包涵体 （内有不停泳动的支原体），判为支原体镜检阳性；上皮细胞上 有支原体包涵体附着或上皮细胞内可见支原体泳动；白细胞 或吞噬细胞内吞噬数量不等、不能消化、大小不一，泳动异常 活跃的支原体。在应用以上诊断标准时要注意两点：如果发 现细胞外有较多运动活跃的类似支原体的微生物应该仔细查 找，以免漏检；要与白细胞内的溶酶体相区别。 １．４．４培养法将洗脱的标本接种于支原体培养一鉴定一 药敏试剂盒（由珠海益民生物工程制品厂提供），于３７℃温箱 培养４８ ｈ，严格按说明书操作。人型支原体与解脲支原体任 一个阳性则判定为阳性。如培养瓶变红色但伴有明显浑浊表 示杂菌污染造成的假阳性，应重新留取标本观察结果，不能重 新留取的则弃掉此例标本，不列入统计范围。 １．５计算和统计方法按配对设计的分类资料进行处理。 ２ 结果 用两种方法对３３９份标本进行了检测，培养法阳性检出 率为４１．９Ｏ，超高倍显微分析系统检出率为４６．０Ｏ，两种检 测方法结果的符合率为８３．５ ，两种方法结果经卡方检验， 具有高度相关性（ 一１ ５１，Ｐ＜０．０５）。两种方法的检测结果 经卡方检验差异无显著性（ 。＝３．０１，Ｐ＞０．０５），（相关数据 见表１）。 表１超高倍镜检与培养结果比较（３３９份） （份） ３讨论 ２Ｏ世纪８Ｏ年代末，美国斯坦福大学的Ｒ．Ｗ．Ｂｒａｄｆｏｒｄ博 士，率先将光电技术与普通光学显微镜结合起来，研制出布氏 显微镜，其放大倍率可达１５ ０００倍，被视为医学显微技术的 重大进展，之后国内也迅速推出类似的产品，应用领域也迅速 拓展。 目前部分检验科把超高倍显微镜应用到临床标本的支原 体活体观察上，因其检测快速简便，成本低廉的特点，得到了 临床医生的欢迎。随着应用的深入，也出现了不少问题。由 于缺乏严谨的论证，其可信度受到了不少质疑，因此大标本、 科学严谨的论证工作是非常迫切的。 本文以液体培养法作为准金标准，应用超高倍显微分析 系统对３３９份标本进行了观察。两种方法的阳性符合率为 ８３．５Ｏ，不符合率为１６．５Ｏ。经配对设计的分类资料的卡方 检验，两种方法统计学上未见差别。因此我们认为超高倍显 微分析系统至少可以作为目前支原体检测方法的有效补充， 因其快速简便的特点很值得作为一种快速过筛检测方法在临 床上推广。 从以上结果看不符合率为１６．５Ｏ，之所以 现两种方法 不一致的结果，可能有以下原因：有些患者自己已经用过药， 造成培养法呈现阴性结果，而超高倍显微镜仍可见支原体残 体；我们使用的是Ｕｕ—Ｍｈ二合一培养基，只是对解脲支原体 和人型支原体进行了检测，而泌尿生殖道感染除这两种外，还 有生殖支原体等引起的感染，在镜下很难对支原体的类型进 行鉴别；Ｌ一型细菌在失去细胞壁后形态与支原体在镜下很难 鉴别。 我们也见到一些同行的观察结果并不完全一致 ，这 提醒我们对统计结果要审慎的判读。出现不一致的结论可能 有下列原因：超高倍显微分析系统依靠的是形态学的辨认，因 此要求检验人员要有丰富的经验；目前还没有建立显微镜下 的诊断标准，每个实验室掌握的标准不一致；有些科研设计不 够严谨，甚至统计方法应用错误。 本文的观察例数还不是很多，过早的预测超高倍显微分 析系统的应用前景还为时尚早，为一种形态学的检测方法，也 有许多不足，比如无法对支原体的种类进行鉴别等。超高倍 显微分析体统应用于支原体活体的检测领域时间还不长，结 果的标准化、与Ｌ一型细菌等一些类似微生物的鉴别等问题都 值得我们检验工作者继续作大量的科学严谨的探讨和研究。 参考文献： ［１］张伟云．泌尿生殖道中生殖支原体感染的研究进展［Ｊ］．国外医 学・微生物学分册，ｌ９９７，２０（１）：３３—３５． ［２３王金良．超高倍显微镜下形态学检查可以确定表原体、支原体 吗？［Ｊ］．中华检验医学杂志，２００１，２４（２）：８１． ［３３卓西等，钱士匀．新编临床检验图谱［Ｍ］．第１版．海南：海南出 版杜．２００１：４０—４２． ［４］卓西．支原体湿片镜捡与培养实验结果分析［Ｊ］．海南医学院学 报，２００３，９（３）：ｌ２９一ｌ３４． ［５３王贵生．超高倍显微镜在泌尿生殖系统疾病诊断中地应用［Ｊ］． ・临床医药实践杂志，２００３，１２（１０）：７７３ ７７４． （收稿日期：２００６—０６—１０） 作者简介：刘长德，男，天津人，１９９４年毕业于天津医科大学，主 管检验医师。
